標本檢測影響因素分析如下：
一、標本的影響：溶血標本及混有紅細胞的血清采ELISA用法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態氧（O），從而催化底物四甲基聯苯胺可溶性的有色物質，即顯藍色，產生假陽性［2］。所以嚴重溶血標本禁用。 標本受細菌污染。因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。 標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本，在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性；為克服上述干擾，ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5 d內測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混合后再測定，但混勻時應輕柔，不可強烈振蕩。 塑料試管能吸附抗原物質，樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管；并使用非抗凝標本，肝素抗凝血漿會增加OD值，EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。 標本凝固不全。 在工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結果；因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
二、 試劑影響 ELISA試劑盒檢測試劑廠家較多；不同廠家出產的試劑
靈敏度與特異性存在一定的差別，使用質劣的試劑必然導致結果的假陽性或假陰性。因此，選擇高質量的試劑是保證結果準確的關鍵之一。
三、操作技術的影響：吸量不準確，直接影響檢測結果。因此加樣器也要經常清洗，定期校準。
溫育影響：抗原抗體結合及酶促反應對溫度有嚴格要求，酶標板周圍與內部孔升降溫速率不同，造成周邊與內部孔結果差異；干浴與水浴存在明顯的差異，盡可能使用水浴，并要求固相板放入水中，減少受熱不均，貼密封膜，防止污物浸入。
加樣次序影響：有時我們在加樣過程中，常常會遇到個別標本未離心等情況，為了節約時間，往往這時我們會先加酶結合物，然后等標本分離好后再加標本，這樣，竟常常會造成HBeAb和HBcAb的假陰性。因為HBeAb和HBcAb都是競爭抑制法，先加入酶標記的抗體，首先與固相載體上的抗原結合，待加入顯色劑后，因酶的存在而顯色，故呈陰性［3］。
