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人血漿中緩激肽的MS定量檢測方法
緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調節因子,還參與炎癥反應。緩激肽可引起血管擴張,從而導致血壓降低。因此,對這種激素肽的變化進行高靈敏度、高選擇性和高準確度地定量,并將其作為疾病進展或藥物治療的評估指標,將會極為有利。盡管以往都是通過配體結合試驗(LBAs)對生物制劑進行定量分析,但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已...
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核酸分離與純化的原則
材料與方法的選擇(一)材料與方法的選擇臨床常見的標本有血液,尿液,唾液,組織及培養細胞等;核酸分離與純化的方法非常多,如何恰當地收集與準備材料,選擇適宜的分離與純化方法是一個首要的問題。首先我們應當明確核酸的分離與純化并不是zui終的目的,不同的實驗研究與應用對核酸的產量,完整性,純度和濃度可能有不同的要求;至于分離與純化核酸所需的時間與成本也往往需要考慮;在不影響核酸質量的情況下,應選擇安全無毒的試劑與方案。近年來,有關試劑盒的開發與自動化儀器的使用,能批量制備核酸樣品,大...
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細胞凋亡的實驗原理
細胞凋亡的實驗原理細胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質膜。當細胞壞死時,質膜不完整,PI就進入細胞內部,它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細胞著色,凋亡細胞和活細胞不著色。而一些活細胞染料由于為親脂性物質,可跨膜進入活細胞,因而可進行活細胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱,它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結合(主要結合于A-T)堿基區),顯示凋亡細胞和活細胞。凡是看到有凋亡小體的細胞都是凋亡細胞。細胞死亡根據其性質、起源...
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動物檢驗檢疫中定量的核酸檢測技術
在動物檢驗檢疫中核酸檢測技術大多數無需要求定量,所以在這只作簡單介紹。核酸檢測的定量化在人醫臨床和動物疫病基礎研究中應用較多,可用于病情評估、療效預測和觀察及預后判斷、疫病的病理分析,具有一定的應用價值。核酸的定量檢測一般有以下兩種方法。(1)定量的核酸雜交技術此類技術以分支鏈DNA信號放大技術(branchedDNAsignalamplificationassay,bDNA)為典型代表,bDNA技術系美國Chiron公司的,屬于一種改良的核酸雜交技術,它定量的基本原理是樣品...
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上海恒遠告知:抗磷脂抗體檢測方法
檢測APLAzui敏感試驗是1983年介紹的ACLA的檢測,后來這種方法得到不斷改進,血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯免疫吸附實驗(ELISA):用純心磷脂的無水乙醇溶液(50/11)包被聚苯乙烯反應板,常規方法洗滌后,用10%的BSA封閉;加l:50稀釋的待測血清,37~C孵育30rain;洗板后,再分別加入HRP標記的抗人γ(1:1500)、抗α(1:1000)、抗μ(1;8000)鏈的F(ab)2片段,37℃30min然后,OPD顯色,加終止液。492nm波長測吸...
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ELISA常用結果判定的方法
1.定性測定(1)陽性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數,試劑制備嚴格標準化,要先計算出陽性對照A值平均數和陰性對照A值平均數。標本A值≥CO值即為陽性。(2)抑制率法:在競爭抑制法中結果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A陰性對照A-A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性2。半定量測定結果一般以滴度表示。將標本連續稀釋后,進行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標本的“滴度”。3。定量測定即用己...
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酶標儀使用注意事項
1、工作環境酶標儀是一種精密的光學儀器,因此良好的工作環境不僅能確保其準確性和穩定性,還能夠延長其使用壽命。A.儀器應放置在無強磁場和干擾電壓的位置。B.儀器應放置在噪音低于40分貝的環境下。C.為延緩光學部件的老化,應避免陽光直射。D.操作環境溫度應在15°C~40°C之間,環境濕度在15%~85%之間。E.操作時電壓應保持穩定。F.操作環境空氣清潔,避免水汽、煙塵。G.保持干燥、干凈、水平的工作臺面,以及足夠的操作空間。2、操作注意事項許多醫院在使用酶標儀之前是通過目測判...
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姬姆薩復合染液常見問題
姬姆薩復合染液常見問題:Q1:如需冷藏,冷凍保存時,具體應保存在幾度(℃)的好?A1:我們推薦的冷藏保存溫度為0℃~10℃之間,冷凍保存的溫度在0℃以下。如未注明保存溫度,原則上保存在15℃以下的陰涼處。Q2:我想知道產品的使用期限?A2:原則上來說,并沒有設定試劑的使用期限或保質期限。因為試劑會因保管條件或其中混入的極微量不純物等的原因,產生經時變化,因此很難嚴格斷定使用期限或保質期限。Q3:為什么標有冷藏保存的產品沒有用冷藏運輸呢?A3:并不是說保存時的溫度條件與運輸時的...